β-半乳糖苷酶染色試劑盒
更新：2020/1/3 15:15:52
| 中文名： | β-半乳糖苷酶染色試劑盒 | 說明書下載 | 暫無 |
| 英文名： | β-Galactosidase Staining Kit | ||
| 描述： | β-半乳糖苷酶染色試劑盒(β-Galactosidase Staining Kit)是以X-Gal為底物，在衰老特異性的β-半乳糖苷酶催化下會(huì)生成深藍(lán)色產(chǎn)物。從而在光學(xué)顯微鏡下很容易觀察到變成藍(lán)色的表達(dá)β-半乳糖苷酶的細(xì)胞或組織。本試劑盒可以用于培養(yǎng)細(xì)胞的衰老檢測(cè)，也可以用于組織切片的衰老檢測(cè)。 絕大多數(shù)正常細(xì)胞被認(rèn)為僅有有限的分裂能力，在不能分裂后就進(jìn)入衰老(senescence)狀態(tài)。此時(shí)細(xì)胞仍然是存活的，但細(xì)胞的基因和蛋白的表達(dá)譜發(fā)生了很大改變。衰老(senescence)的細(xì)胞不能在一些常規(guī)的刺激下再誘導(dǎo)細(xì)胞分裂，并且衰老細(xì)胞的細(xì)胞周期分布也比較特殊，不同于一些損傷誘導(dǎo)的細(xì)胞休眠，也不同于細(xì)胞生長接觸抑制的情況。衰老細(xì)胞細(xì)胞通常體積變大，表達(dá)pH 6.0時(shí)有高酶活性的β-半乳糖苷酶。細(xì)胞衰老也被認(rèn)為是生物體抑制腫瘤的一種方式，同時(shí)也是生物體老化(aging)的一種潛在原因。 | ||
| 貨號(hào) | 規(guī)格 | 價(jià)格 | 品牌 |
| G0622 | 100T | 520 | GBCBIO |
產(chǎn)品簡介： β-半乳糖苷酶染色試劑盒(β-Galactosidase Staining Kit)是以X-Gal為底物，在衰老特異性的β-半乳糖苷酶催化下會(huì)生成深藍(lán)色產(chǎn)物。從而在光學(xué)顯微鏡下很容易觀察到變成藍(lán)色的表達(dá)β-半乳糖苷酶的細(xì)胞或組織。本試劑盒可以用于培養(yǎng)細(xì)胞的衰老檢測(cè)，也可以用于組織切片的衰老檢測(cè)。 絕大多數(shù)正常細(xì)胞被認(rèn)為僅有有限的分裂能力，在不能分裂后就進(jìn)入衰老(senescence)狀態(tài)。此時(shí)細(xì)胞仍然是存活的，但細(xì)胞的基因和蛋白的表達(dá)譜發(fā)生了很大改變。衰老(senescence)的細(xì)胞不能在一些常規(guī)的刺激下再誘導(dǎo)細(xì)胞分裂，并且衰老細(xì)胞的細(xì)胞周期分布也比較特殊，不同于一些損傷誘導(dǎo)的細(xì)胞休眠，也不同于細(xì)胞生長接觸抑制的情況。衰老細(xì)胞細(xì)胞通常體積變大，表達(dá)pH 6.0時(shí)有高酶活性的β-半乳糖苷酶。細(xì)胞衰老也被認(rèn)為是生物體抑制腫瘤的一種方式，同時(shí)也是生物體老化(aging)的一種潛在原因。
儲(chǔ)存和穩(wěn)定性: -20℃保存，一年有效。其中X-Gal溶液需避光保存。
試劑盒組成:
使用說明： 1. 對(duì)于貼壁細(xì)胞： 1.1．對(duì)于6孔板中培養(yǎng)的細(xì)胞，吸除細(xì)胞培養(yǎng)液，用PBS或HBSS洗滌1次，加入1毫升4%多聚甲醛固定液，室溫固定15分鐘。對(duì)于其它類型的培養(yǎng)板，固定液及后續(xù)溶液的用量參照此比例進(jìn)行操作。 1.2．吸除細(xì)胞固定液，用PBS或HBSS洗滌細(xì)胞3次，每次3分鐘。 1.3．吸除PBS或HBSS，每孔加入1毫升染色工作液。使用聚丙烯(polypropylene)容器，不能使用聚苯乙烯(polystyrene)容器配制染色工作液。染色工作液按下表比列配制：
說明：對(duì)于聚丙烯容器和聚苯乙烯容器的簡單的判定方法是：聚丙烯容器可以高溫高壓滅菌； 而聚苯乙烯容器不適合高溫高壓滅菌，一旦高溫高壓處理就會(huì)嚴(yán)重變形。配制染色工作液時(shí)，可能有少量絮狀沉淀出現(xiàn)，震蕩混勻后就會(huì)完全溶解，且需要待溶解完全后才能使用。 1.4．37℃孵育過夜，可以用parafilm或保鮮膜封住6孔板防止蒸發(fā)。注意：37℃孵育不能在二氧化碳培養(yǎng)箱中進(jìn)行。 1.5．普通光學(xué)顯微鏡下觀察。如不能及時(shí)觀察計(jì)數(shù)，可以去除染色工作液，加入2毫升PBS，4℃可以保存數(shù)天；或者加上封片液封片后，4℃可以保存較長時(shí)間。 2. 對(duì)于懸浮細(xì)胞： 2.1. 離心收集細(xì)胞至1.5ml離心管內(nèi)，用PBS或HBSS洗滌1次，加入1毫升4%多聚甲醛固定液，室溫固定15分鐘。固定時(shí)可以在搖床上緩慢搖動(dòng)，以避免細(xì)胞結(jié)成團(tuán)塊。 2.2. 離心，吸除細(xì)胞固定液，用PBS或HBSS洗滌細(xì)胞3次，每次3分鐘。 2.3. 離心，吸除PBS或HBSS，每管加入0.5-1毫升染色工作液。染色工作液的配制方法參考上表。 2.4. 37℃孵育過夜。注意：37℃孵育不能在二氧化碳培養(yǎng)箱中進(jìn)行。 2.5. 取部分染色后的細(xì)胞，滴加到載玻片上或6孔板內(nèi)，普通光學(xué)顯微鏡下觀察。如不能及時(shí)觀察計(jì)數(shù)，可以離心，去除染色工作液，然后加入1毫升PBS，4℃可以保存數(shù)天。如果離心，取細(xì)胞用于涂片，加上封片液封片后，4℃可以保存較長時(shí)間。 3. 對(duì)于組織切片： 3.1. 對(duì)于石蠟切片先按照常規(guī)方法進(jìn)行脫蠟和水化處理。對(duì)于冷凍切片直接按照以下步驟進(jìn)行。 3.2. 加入適當(dāng)體積的β-半乳糖苷酶染色固定液，以充分蓋住組織為宜，室溫固定不少于15分鐘。 3.3. 用PBS浸泡洗滌組織3次，每次不少于5分鐘。 3.4. 吸除PBS，加入適當(dāng)量的染色工作液。染色工作液的配制方法參考表1。 3.5. 37℃孵育過夜，可以用parafilm或保鮮膜封住防止蒸發(fā)。最好把整個(gè)切片浸泡在染色工作液中。 注意：37℃孵育不能在二氧化碳培養(yǎng)箱中進(jìn)行。
3.6. 普通光學(xué)顯微鏡下觀察。如不能及時(shí)觀察，加上封片液封片后4℃可以保存較長時(shí)間。
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